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什么是細胞培養(yǎng)?

來源: | 發(fā)布日期:2023-10-31 | 瀏覽量:1

細胞培養(yǎng)是動物或植物細胞在人工受控環(huán)境中的生長。細胞要么直接從生物體中取出并在培養(yǎng)前分解,要么從先前建立的細胞系或細胞株中取出。

某些培養(yǎng)條件取決于細胞類型,但是,每種培養(yǎng)物都必須包含合適的容器和基質或培養(yǎng)基,為培養(yǎng)細胞提供營養(yǎng)物(例如氨基酸、碳水化合物、維生素、礦物質)、生長因子或必需激素。氣體(O2、CO2)、理化環(huán)境(pH、滲透壓、溫度)在人工環(huán)境中調節(jié)細胞的正常生長也發(fā)揮著重要作用。

細胞培養(yǎng)應用

是分子和細胞生物學中主要的一致且可重復的工具。

有助于研究正常細胞穩(wěn)態(tài)、細胞生物化學、新陳代謝、突變、疾病和復合效應。

是疾病和藥物篩選的模型系統(tǒng)。

基本細胞培養(yǎng)設備

細胞培養(yǎng)實驗室的具體設備取決于所進行的研究類型,但是所有細胞培養(yǎng)實驗室都有相同的共同目標:沒有病原微生物。

下面的擴展列表對應了大多數(shù)細胞培養(yǎng)實驗室的設備和用品,使工作更加高效和準確。

細胞培養(yǎng) - 70%乙醇防腐劑 - 細胞培養(yǎng)箱
- 吸氣泵 - 離心機
- 高壓滅菌器 - 冰箱冰柜
- 細胞計數(shù)器 - 手套
- 細胞培養(yǎng)瓶 - 培養(yǎng)基、血清、細胞培養(yǎng)基添加劑
- 細胞培養(yǎng)級培養(yǎng)皿 - 各種容量的移液器
- 各種尺寸的細胞培養(yǎng)級管 - 血清移液管
- 細胞培養(yǎng)罩 - 無菌過濾器
- 細胞培養(yǎng)微孔板 - 廢物容器

*請注意:具體的細胞培養(yǎng)設備取決于細胞類型和研究目的

細胞培養(yǎng)安全

在細胞培養(yǎng)實驗室工作與不同的風險因素和危害有關,例如毒素或誘變試劑。人類/動物材料可能含有病毒和其他危險的生物制劑。因此,在操作人類/動物材料時,遵循實驗室實踐的一般安全指南非常重要。

1. 進入和離開實驗室前要洗手。

2. 穿戴安全服(手套、封閉鞋、實驗服)。

3、不飲食、不吸煙。

4. 不產生氣溶膠或產生很少的氣溶膠。

5. 實驗前后對所有表面進行凈化。

6. 按照設施指南工作。

7. 以適當?shù)姆绞教幹盟袕U物。

8. 僅限授權人員進入。

9.避免使用鋒利的物體。

10. 始終為所有樣品貼上清晰的標簽。

11. 向安全官員報告所有事件。

細胞培養(yǎng)時所需的無菌技術

為了在細胞培養(yǎng)中取得成功,必須保持無污染的環(huán)境(細菌、真菌等)。無菌技術可確保沒有微生物進入細胞培養(yǎng)物。通過一系列程序確保細胞培養(yǎng)無菌。

細胞培養(yǎng)時需要無菌技術

處理 試劑/介質 職場
緩慢/小心處理。 所有試劑/設備的預滅菌 細胞培養(yǎng)罩工作正常
開始前對所有物品進行消毒。 試劑無污染(有效期、外觀正常)。 經常凈化(抽油煙機、冰箱等)
無菌移液器   工作區(qū)域:無菌、整潔
禁止將無菌物品接觸未滅菌的表面    



細胞培養(yǎng)環(huán)境

細胞培養(yǎng)是一種神奇的工具,可以輕松控制和操作所有理化和生理細胞因素,例如溫度、滲透壓、pH、氣體、激素和營養(yǎng)物質。

細胞培養(yǎng)環(huán)境。

媒體 酸堿度 溫度 二氧化碳
含有營養(yǎng)素、生長因子和激素 哺乳動物細胞的平均 pH 值為 7.4 取決于宿主的體溫 受媒體控制
生長血清源、tipids、激素   哺乳動物細胞系 36-37°C 有機或 CO2 碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)很受歡迎
    插入細胞系 27-30°C 會影響 pH 值
      4-10% C02 最常見


細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基補充劑

培養(yǎng)基補充劑有助于根據(jù)所選組織或細胞類型優(yōu)化特定應用的細胞生長。使用生長因子或細胞因子等培養(yǎng)基補充劑的優(yōu)點是它們可以改善細胞活力和生長,并使細胞更長時間地保持健康。例如,成纖維細胞生長因子 (FGF) 在體內和體外的多種生物學功能中發(fā)揮著重要作用,并且可以在周末維持細胞培養(yǎng),因為 Proteintech 耐熱 FGF (HZ-1285) 不需要每天更換培養(yǎng)基。

細胞培養(yǎng) FGFbasic-TS 和 FGF basic(源自大腸桿菌)在 37°C 下無異源、化學成分確定的細胞培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性。連續(xù) 3 天每天通過 ELISA 測定蛋白質濃度。37°C 孵育一天后,檢測不到 FGF basic,而第 1、2 和 3 天時 FGFbasic-TS 的濃度分別為起始濃度的 60%、35% 和 20%。

生長因子對于維持體外培養(yǎng)物的生長起著至關重要的作用。 根據(jù)環(huán)境的不同,某些細胞可以產生多種譜系特異性的細胞類型。