隨著現(xiàn)代研究人員越來越多地使用高價值的小容量樣品，對先進(jìn)移液技術(shù)/協(xié)議的需求是顯而易見的。為了準(zhǔn)確檢測小樣本量的微觀變化，試管和小瓶正逐漸被微孔板取代，微孔板需要微升/納升范圍內(nèi)的試劑。

在處理小容量時，溫度和分配精度等因素對于控制和操作至關(guān)重要。如果您希望在使用少量液體時獲得一致的結(jié)果，您需要識別并消除所有潛在的錯誤來源，并定期檢查您的實驗室工作流程。這適用于因使用錯誤的移液儀器和不準(zhǔn)確的移液技術(shù)而導(dǎo)致的錯誤。以下是準(zhǔn)確移液小容量的一些技巧。

使用正確的移液器和移液器吸頭

由于容量誤差在低樣本量時更為突出，因此選擇能夠提供與研究方案一致的樣本量的移液器非常重要。確保選擇盡可能小的移液器來處理樣品容量。例如，如果您要移取 1 μL 樣品，請使用2-5 μL 移液器，而不是 20 μL 移液器。

此外，您需要知道是否為您的工作流程使用了正確類型的移液器。例如，容積式移液器非常適合處理揮發(fā)性、粘性和其他類型的難處理樣品。建議您在選擇適合您的實驗需要的移液器類型時閱讀制造商的說明手冊。實驗室報告的大多數(shù)錯誤是由于液體揮發(fā)性或粘度以及意外的環(huán)境變化引起的。您必須確保您的移液技術(shù)與周圍條件、樣品類型和樣品量相一致。

使用正確的移液技術(shù)

在使用特定的移液技術(shù)處理較小的液體容量時，有各種注意事項。例如，您需要確保將移液器保持在適當(dāng)?shù)拇怪蔽恢?，并將移液器從樣品容器中筆直拉出，同時避免接觸容器的側(cè)面。

對于小于 50 μL 的樣品容量，應(yīng)避免以一定角度握持移液器，因為它會改變液體的吸液量。此外，如果您讓移液器吸頭接觸容器的側(cè)面，它會產(chǎn)生一個芯吸過程，從而降低分配的液體量。

此外，重要的是您在吸液后和從液體中取出吸頭之前要始終保持暫停。此外，嘗試使用一致的柱塞壓力和速度。 平穩(wěn)地壓下柱塞，直到它停止，浸入移液器吸頭，然后以恒定速率釋放它。建議這樣做，因為這樣的重復(fù)操作可能會產(chǎn)生可重復(fù)的結(jié)果。

考慮各種環(huán)境溫度

您需要確保在設(shè)計移液工作流程時考慮到各種環(huán)境因素，包括實驗室的溫度、壓力和濕度水平。專家建議您不應(yīng)在低于實驗室環(huán)境溫度的溫度下移液小容量。實驗室的環(huán)境溫度將直接影響儀器移液樣品的精確容量，因為較高溫度引起的熱膨脹可能會增加樣品和移液器吸頭之間的空氣空間，并顯著減少分液容量。

在實驗室環(huán)境中平衡小容量樣品有助于顯著減少容量誤差，并防止冷液體的過度分配。此外，您可以在處理極冷或極熱的液體時使用正排量移液器，以保持更高水平的精確度和準(zhǔn)確度。

預(yù)潤濕移液器吸頭

為了正確吸取和分配小容量樣品，您必須在開始移液工作流程之前預(yù)先潤濕移液器吸頭。預(yù)潤濕主要涉及在執(zhí)行后續(xù)移液步驟之前將移液器吸頭浸入液體中。

盡管使用了經(jīng)過驗證的移液技術(shù)，但未能預(yù)先潤濕移液器吸頭會導(dǎo)致蒸發(fā)增加和輸送量減少。預(yù)潤濕移液器吸頭使您能夠通過增加腔室內(nèi)的濕度水平來分配準(zhǔn)確和精確的液體量，從而在移液過程中限制液體蒸發(fā)。

使用正確的浸入深度

在吸氣之前，將吸頭正確浸入半月板下方很重要。對于大容量移液器 (1-5 mL)，浸入深度應(yīng)至少為 5-6 mm，而對于較小容量移液器，深度應(yīng)在 2-3 mm 左右。

如果您將其浸入得太少，特別是大容量移液器，可能會導(dǎo)致吸入空氣。另一方面，如果您將其浸入過多，它會使液體粘在移液器吸頭表面，從而導(dǎo)致容量誤差。

如果您忽略上述任何變量，錯誤潛入您的工作流程的機會可能會急劇增加，從而導(dǎo)致結(jié)果不可靠。隨著樣品容量越來越小，其物理特性、環(huán)境溫度和移液技術(shù)的影響變得越來越突出，使得移液工作流程變得相當(dāng)艱巨。遵循最佳實踐并注意幾個關(guān)鍵方面可能會改進(jìn)您的移液技術(shù)并幫助您獲得所需的高度準(zhǔn)確的結(jié)果！

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