熱門關(guān)鍵詞: 自動(dòng)化吸頭 移液器吸頭 PCR管 細(xì)胞培養(yǎng)皿
當(dāng)移液量程從 0.2 到 5 μL 時(shí),移液準(zhǔn)確度和精密度至關(guān)重要,因此良好的移液技術(shù)至關(guān)重要,因?yàn)樾×砍虝r(shí)處理錯(cuò)誤更加明顯。
隨著越來(lái)越多的重點(diǎn)放在降低試劑和成本上,對(duì)較小量程的需求量很大,例如用于制備 PCR Mastermix 或酶反應(yīng)。但是,移取 0.2 – 5 μL 的小量程對(duì)移液準(zhǔn)確度和精密度提出了新的挑戰(zhàn)。以下幾點(diǎn)是必不可少的:
移液器和吸頭尺寸:始終選擇標(biāo)稱量程盡可能小且吸頭最小的移液器,以使氣墊盡可能小。例如,當(dāng)移取 1 μL 時(shí),選擇 0.25 – 2.5 μL 移液器和匹配的吸頭,而不是 1 – 10 μL 移液器。
校準(zhǔn)和維護(hù):正確校準(zhǔn)和維護(hù)移液器至關(guān)重要。移液器上的小調(diào)整和損壞的部件會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)和隨機(jī)誤差值的大量增加。根據(jù) ISO 8655 必須每年進(jìn)行一次校準(zhǔn)。
容積式移液器:檢查您的實(shí)驗(yàn)室中是否有容積范圍較小的容積式移液器。一般來(lái)說(shuō),使用這種類型的移液器在準(zhǔn)確度和精確度方面比使用經(jīng)典氣墊移液器的移液結(jié)果更好。
嘗試使用更大的量程:您可以考慮稀釋樣品以在最終反應(yīng)中以相同的數(shù)量吸取更大的量程。這可以減少樣品量程非常小的移液錯(cuò)誤。
除了好的工具外,研究人員還必須具備非常好的移液技術(shù)。請(qǐng)?zhí)貏e注意以下步驟:
吸頭連接:請(qǐng)勿將移液器卡在吸頭上,因?yàn)檫@可能會(huì)損壞精細(xì)的吸頭端,導(dǎo)致液體束重新定向或損壞孔口。僅在連接吸頭時(shí)施加輕微壓力,并使用帶有彈簧式吸頭錐的移液器。
握持移液器:在等待離心機(jī)、循環(huán)儀等時(shí),請(qǐng)勿將移液器握在手中。移液器內(nèi)部會(huì)發(fā)熱并導(dǎo)致氣墊膨脹,導(dǎo)致移液時(shí)與設(shè)定的量程發(fā)生偏差。
預(yù)潤(rùn)濕:吸頭和移液器內(nèi)的空氣加濕使吸頭為樣品做好準(zhǔn)備,并避免在吸取轉(zhuǎn)移量程時(shí)蒸發(fā)。
垂直抽吸:這在處理小量程時(shí)非常重要,以避免移液器傾斜時(shí)發(fā)生的毛細(xì)管效應(yīng)。
浸入深度:盡可能少地浸入吸頭,以防止液體由于毛細(xì)管效應(yīng)進(jìn)入吸頭。經(jīng)驗(yàn)法則:尖端和量程越小,浸入深度越低。移液小量程時(shí),我們建議最大為 2 mm。
以 45° 角分液:當(dāng)移液器保持在 45° 角時(shí),可以保證液體的最佳流出。
與容器壁或液體表面接觸:只有當(dāng)尖端緊貼容器壁或浸入液體中時(shí),才能正確分配小量程。即使是尖端的最后一滴也可以準(zhǔn)確分配。
吹出:在分配少量液體后必須吹出,以分配尖端中存在的最后一滴液體。吹掃也應(yīng)靠著容器壁進(jìn)行。在液面吹氣時(shí),注意不要將氣泡帶入樣品中。