熱門關鍵詞: 自動化吸頭 移液器吸頭 PCR管 細胞培養(yǎng)皿
凡是混入細胞培養(yǎng)環(huán)境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為污染,細胞污染不能完全被消除,但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴重性。
常見污染類型
1. 細菌污染
特征:大小在0.5~5 μm,比動物細胞小很多。多呈球狀或桿狀,形態(tài)規(guī)則,分布均勻;增殖速度快,一般污染后48~72小時爆發(fā)式增殖;營養(yǎng)消耗快,培養(yǎng)基很快變黃,變渾濁;鏡下觀察有明顯的定向運動。
處理方法:輕度污染可用10X雙抗清洗處理,重度污染建議消殺后丟棄。
2. 真菌污染
特征:呈鏈球狀或絲狀。常形成肉眼可見的菌落,培養(yǎng)基顏色無變化或變紫,僅對局部細胞影響較大,其他地方生長正常。會形成孢子,容易污染其他細胞。
處理方法:真菌污染較難根除,不建議保留,建議消殺后丟棄。
3. 支原體污染
特征:最小的微生物,無法通過光學顯微鏡看見,但可通過電鏡觀察到。感染支原體的細胞,在某一時間點碎片突然增多,隨著傳代,細胞狀態(tài)顯著變差。支原體污染可通過氣溶膠傳播,影響同一細胞房其他細胞。
鑒定方法:PCR法、顯色法、熒光染色法等。
處理方法:若細胞狀態(tài)尚可,添加支原體抑制劑培養(yǎng)2-3代可轉陰;若細胞狀態(tài)很差,建議消殺后丟棄。
4. 黑膠蟲污染
特征:無明確定義,鏡下無法直接觀察到。主要表現(xiàn)為細胞狀態(tài)差,黑點和碎片多,布朗運動。通過檢測發(fā)現(xiàn)主要為支原體污染,部分為未知的增殖不明顯的微生物污染。
處理方式:若細胞狀態(tài)尚可,添加黑膠蟲/支原體抑制劑培養(yǎng)2-3代可轉陰;若細胞狀態(tài)很差,建議消殺后丟棄。
5. 細胞交叉污染
特征:即不同的細胞混雜在一起
鑒定方法:同種屬:STR鑒定,多等位基因數大于3個。
不同種屬:PCR法,對種屬特異性基因進行擴增,不同種屬產物大小不同。
處理方法:建議重新引種。
以上是常見的細胞污染的類型及處理方法,希望大家牢記并能對后續(xù)實驗有所幫助。
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