在細(xì)胞培養(yǎng)中控制的許多變量中，一個特定的變量會影響整個實驗：污染。細(xì)胞污染的一個影響因素并不總是在雷達(dá)上，盡管它可以默默地影響細(xì)胞健康并影響測量數(shù)據(jù)，但它是移液污染。

在設(shè)計實驗時，移液器、移液器吸頭和移液程序的選擇很少受到關(guān)注。即使是避免移液污染的一攬子解決方案（高壓滅菌）也可能不像通常認(rèn)為的那樣有效。

細(xì)胞培養(yǎng)的第一條規(guī)則：避免污染。為什么無菌技術(shù)對于成功的細(xì)胞培養(yǎng)如此重要？

無菌技術(shù)是獲得可靠和可重復(fù)結(jié)果的唯一方法。污染會影響細(xì)胞生長、新陳代謝和健康——這正是科學(xué)家們有興趣研究的東西。受污染的細(xì)胞系不具有所需的特性，并且它們每次的功能都不同，具體取決于污染的嚴(yán)重程度。此外，如果污染物使您感興趣的細(xì)胞過度生長，您最終可能會研究錯誤的生物體。  

科學(xué)家經(jīng)常遇到哪些類型的污染物？

常見的污染源是細(xì)菌、酵母菌和霉菌。在細(xì)胞培養(yǎng)工作中，最難檢測和根除的就是支原體。不太常見的污染類型包括，例如，實驗室消耗品中的塑料可浸出物。

細(xì)胞污染的常見原因有哪些？

污染的常見來源是不良的移液操作，例如使用受污染的移液器和非過濾器吸頭。此外，缺乏良好的實驗室實踐也是一個問題，例如，對培養(yǎng)箱或?qū)恿鞴竦葍x器的去污不充分。要去除支原體，需要使用 0.1 μm 而不是 0.2 μm 過濾器進(jìn)行過濾。

三種移液污染：

1. 移液器到樣品污染： 移液器或移液器吸頭污染了樣品。

如何避免：

使用經(jīng)過消毒的過濾芯吸頭，以防止移液器主體受到污染。

每次樣品后更換移液器吸頭。

定期用乙醇對移液器進(jìn)行高壓滅菌或消毒。選擇與高壓滅菌器兼容的移液器。

2. 樣品到移液器污染：移液 樣品進(jìn)入移液器主體，污染移液器。

如何避免：

使用過濾器吸頭或正位移吸頭防止樣品進(jìn)入移液器主體。

移液時，將移液器保持在垂直位置。將移液器豎直存放。

移液時傾斜瓶子。

緩慢松開按鈕，避免樣品飛濺進(jìn)入移液器。選擇配備軟彈出功能的移液器。

3. 樣品間污染： 殘留的移液樣品被轉(zhuǎn)移到下一個樣品。通常在多次使用相同的吸頭時發(fā)生。

如何避免：

每次樣品后更換移液器吸頭。

使用過濾器吸頭或正位移吸頭防止樣品進(jìn)入移液器主體，并進(jìn)入下一個樣品。

確保移液器吸頭在移液器上密封，以避免樣品泄漏。例如， 永岳醫(yī)療的吸頭。

有沒有科學(xué)家甚至可能不知道的污染因素？

 高壓滅菌的效率通常不會得到驗證，如果高壓滅菌器不能正常工作，高壓滅菌的移液器吸頭可能不是無菌的。包裹在保護(hù)包裝中的預(yù)滅菌過濾嘴是防止此類意外的最安全選擇。定期對優(yōu)質(zhì)移液器吸頭的預(yù)滅菌過程進(jìn)行驗證，以確保預(yù)滅菌的效率。

移液和分液工具如何使科學(xué)家能夠在無菌環(huán)境中更輕松地處理樣品？

選擇正確的移液器和移液器吸頭可以使無菌工作流程變得更加容易。永岳醫(yī)療移液器易于清潔和無需工具即可打開，從而加快了日常清潔。由于高壓滅菌比用乙醇擦拭更有效地去除污染，賽多利斯機械移液器完全可高壓滅菌，這意味著您可以可靠地對移液器進(jìn)行凈化。軟吸頭彈出可防止吸頭彈出時飛濺引起的潛在污染風(fēng)險。預(yù)先滅菌的過濾器吸頭可保護(hù)您的樣品免受交叉污染。永岳醫(yī)療吸頭也采用防漏包裝，這意味著儲存和交付條件下的任何污染都不會接觸到吸頭或吸頭盒。

科學(xué)家如何避免污染？您對無菌工作有哪些重要建議？

首先，良好的實驗室實踐和對工作步驟的仔細(xì)規(guī)劃。確保僅將特定工作流程所需的東西保留在層流柜中，并同時使用一種細(xì)胞培養(yǎng)物。此外，定期檢測支原體等污染物可讓您高枕無憂，相信您的結(jié)果。在無菌條件下工作時，花在預(yù)先消毒的濾芯吸頭和無菌試劑上的錢是物有所值的。